抗菌制品測試方法及標準
近年來,國內抗菌行業(yè)的專家與學者的也做了大量探索,促進了國內抗菌產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,并制定了相關的標準。如FZ/T 01021-1992<織物抗菌性能試驗方法>、GB15975-1995<一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標準>及<消毒技術規(guī)范>等。
檢測抗菌性能的抗菌制品一般分為三大類型:第一種為抗菌紡織品,第二種為抗菌塑料,第三種為抗菌陶瓷。其中的檢測方法中包括對細菌的檢測和對霉菌的檢測。一般抗菌制品的測試方法分為定量試驗方法和定性試驗方法,也有的分為適于溶出型和非溶出型抗菌劑的檢測,還有的是按照菌液接種于織物上和織物置于一定濃度的菌液中兩條思路來分類。
抗菌標準及測試方法的合理性及正確性對整個抗菌產(chǎn)業(yè)的發(fā)展起著重要的作用,包括測試方法設計的準確性與科學性,操作誤差的合理控制,以及試驗本身所帶來的誤差大小等。隨著國內外抗菌產(chǎn)業(yè)的興起和科技的進步,也促使抗菌標準與方法不斷完善。其中,國外抗菌產(chǎn)業(yè)的發(fā)展已經(jīng)有幾十年的歷史,所以較早就提出了具有代表性和穩(wěn)定性的抗菌測試方法,近年來又作了修改與完善。
下面分別對抗菌紡織品及相關抗菌制品抗菌(細菌和霉菌)檢測方法進行闡述。
一、抗菌紡織品測試方法
用于抗菌紡織品的測試方法如下:
1.奎因試驗法(QUINN TEST)
該方法是QUINN創(chuàng)立的織物抗菌性能測試方法,發(fā)表在<>{14(1),1-7,1966. 14(2),183-188,1966}。該方法的基本原理是將試驗菌液接種于織物上,再覆蓋以半固體瓊脂培養(yǎng)基,在一定條件下培養(yǎng)一段時間后,觀察織物上的菌落數(shù),計算出抑菌率。該方法也是世界上第一部測試織物抗菌能力的定量測試方法,簡潔方便,應用廣泛。
2.平行畫線法(條紋法):
此種測試方法為簡易、快速的定性試驗方法,適用于耐水洗和耐干洗的抗菌整理織物的抗菌特性測試,其原理為:通過劃平行線的方法將菌液接種于瓊脂培養(yǎng)基上,將樣品貼于瓊脂表面上,在一定條件下培養(yǎng)一段時間后,檢查瓊脂表面沿劃線部位由于細菌繁殖中斷而出現(xiàn)的清潔區(qū),為抗菌活性的大小劃分等級,評價織物抗菌能力的大小。
3.改良的奎因試驗法:
著名的青島醫(yī)學院微生物學專家鄒承淑教授(筆者的重要合作伙伴)在八十年代初開始改進QUINN TEST,之后經(jīng)過國內醫(yī)學界共同努力完成了中國版的QUINN TEST–改良的奎因試驗法。本方法是在奎因試驗法的基礎上作了修改,原理也是將試驗菌液接種于織物上,覆蓋以培養(yǎng)基,經(jīng)一定時間培養(yǎng)后,觀察計數(shù)抗菌和未抗菌織物上的菌落數(shù),計算抗菌率的大小,定量測試抗菌織物的抗菌性能。本方法是一種簡便、快速、重現(xiàn)性好的定量試驗方法,對于原始的奎因試驗法相比,具有以下優(yōu)點:
①一次能測試幾種不同織物對同一種細菌的抗菌性能,提高了測試效率,節(jié)省時間。
②接種菌液濃度?。?000個/ml),營養(yǎng)充足,菌落變大,易用肉眼來直接觀察菌落的生長,避免用顯微鏡觀察造成污染。
③稀釋菌液用生理鹽水代替肉湯,避免稀釋過程中細菌增長,影響試驗準確性。
④省略了織物加菌液后,在一定的相對濕度下干燥的過程,簡化了實驗步驟,也避免了干燥過程中因溫度掌握不準而使細菌死亡的弊病。
但本方法中也存在一些不足之處:
④本方法在覆蓋瓊脂培養(yǎng)基步驟中,為避免培養(yǎng)基溢出樣品外,將加菌液后的樣品平皿放入冰箱內15min,其中沒有規(guī)定具體的溫度,不適合的溫度會造成細菌的死亡或增長,一般在5-10℃能保證細菌不會死亡且不會增長,但本方法中沒有規(guī)定,在樣品的挪動過程中從而會影響試驗結果。
4.抑菌環(huán)試驗法(暈圈法):
將試驗菌接種于瓊脂培養(yǎng)基平板表面,再貼放上試驗樣品,由于抑菌劑不斷溶解以致在瓊脂中擴散形成抑菌環(huán),通過測量抑菌環(huán)的寬度來評價抗菌能力的大小。
5.AATCC 100試驗法
此種測試方法為美國AATCC委員會提出的一種定量測試方法,用于檢測織物的殺菌能力和抑菌能力,是目前國外比較著名的抗菌性能測試方法,也是后來國內外一些新方法的起源。此方法的原理為:織物對照樣與試樣經(jīng)細菌接種并在一定條件下培養(yǎng)后,加入中和液來洗脫細菌,且用稀釋平板法測定洗脫液中的菌液濃度,進行活菌培養(yǎng)計數(shù),得到抗菌織物的細菌減少百分率,評價該織物抗菌殺菌性能。
6.JIS L 1902 2002試驗方法
本標準是在JIS L 1902 1998試驗方法的基礎上又進一步修改而成的試驗方法,本方法也是介紹了兩種試驗方法,定性試驗方法和定量試驗方法,但是定量試驗方法介紹了兩種,分別為菌液吸收法和細菌接種法,其定性方法(抑菌環(huán)法)和菌液吸收法同JIS L 1902 1998標準中原理及方法基本相同,其細菌接種法原理是將細菌在加壓條件下接種至調濕過的試驗片上,然后在一定濕度下培養(yǎng)一段時間,再對樣品進行洗脫,活菌計數(shù),得細菌減少值。
本方法對不同試驗目的和用途及織物不同處理應用的試驗細菌作了詳細的規(guī)定,并且介紹了菌液吸收法用于測定織物滅菌活性值,用細菌接種法,計算細菌減少值。
7.JIS Z 2911抗霉菌試驗法
本方法是針對于霉菌而制定的一種測試方法,其基本原理為:在樣品及培養(yǎng)基上均勻地噴灑一定量的混合孢子懸液,培養(yǎng)一定時間后,觀察試樣上的長霉情況,對抗霉菌性能進行分等級定性評價。
8.振蕩燒瓶法:
振蕩燒瓶法是模仿人體的穿著條件,使細菌在振蕩條件(300r/min)下與織物內抗菌劑接觸,振蕩1-6h之后,經(jīng)細菌培養(yǎng)計數(shù),計算細菌減少百分率,從而確定抗菌性能大小。
應用此測試方法時,被測試樣不受紡織品形狀的限制,本方法不僅適用于一般的紡織織物,而且還適用于凹凸不平的織物、有毛或羽的織物和粉末狀織物等,其使用范圍廣泛。而且還可適用于抗菌塑料、抗菌瓷磚等抗菌制品。塑料等拒水性材料應先將其制成微粒再進行試驗。
9.FZ/T 01021-92試驗方法
此方法是國內根據(jù)美國的AATCC100-1981制定的紡織行業(yè)標準,是測試抗菌性能的一種定量測試方法。其基本原理為:將試驗菌接種于織物(對照樣和試樣)上,經(jīng)“0”接觸時間培養(yǎng)和一定時間培養(yǎng)后,對樣品進行洗脫,然后對其洗脫液進行活菌計數(shù),計算出試樣的細菌減少百分率。本方法對活菌培養(yǎng)計數(shù)中平皿菌落數(shù)的測定作了非常細致的規(guī)定,但是,本標準中一定時間培養(yǎng)后用100ml緩沖液洗脫,劇烈搖晃1min,此工藝還有待于探討,因為劇烈搖晃有可能會造成細菌的增長或減少,就會影響試驗結果。
10.JIS L 1902 1998試驗方法
此方法為日本的工業(yè)標準,規(guī)定了定性試驗方法(暈圈法)和定量試驗方法(浸漬法)。其中定性試驗方法只可測試出是否具有抗菌性能,而不能準確測定出抗菌率。但此方法非常簡便,易于操作。其原理為將試樣放于平板培養(yǎng)基中心,經(jīng)一段時間培養(yǎng)后,觀察樣品周圍產(chǎn)生的抑菌環(huán),計算抑菌環(huán)寬度,評價試樣是否具有抗菌能力。同時,其試驗有效性的判定也非常簡便,觀察未處理樣品經(jīng)培養(yǎng)后有沒有出現(xiàn)細菌增值即可。本方法中還對試樣的要求作了非常細致的規(guī)定,包括織物、紗線、軟填料和長絨毛等。
定量試驗方法(浸漬法)原理也是通過對試樣接種細菌與培養(yǎng),對“0”時間接觸培養(yǎng)和一定時間培養(yǎng)后進行活菌計數(shù),計算出抑菌活性值和殺菌活性值。本方法特點為:
①不同于其它方法中通過比濁管比濁來粗測菌液濃度的方法,而是用分光光度計測定其吸收率來確定菌液濃度,提高了試驗的準確度。
②用冷凍的生理鹽水(0.85%)來洗脫培養(yǎng)后樣品,避免細菌在洗脫過程中增長或減少,保證所需測定細菌數(shù)的準確性,減少試驗誤差。
③在計算結果時,應用抑菌活性值和殺菌活性值比較全面的來表現(xiàn)試樣的抑菌和殺菌能力,而且應用對數(shù)值來體現(xiàn)試驗結果。
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