圖顯示出不同成分的糖形成了有區(qū)別的顏色透明度。這一方法特別適用于定性測定,但也可采納苔黑素法檢測全部糖的成分。比較左圖中的幾條曲線,說明不同的糖會和同量苔黑素溶液形成不同的顏色深度。這種方法可通過顏色深度或完度值估算出棉纖維中蜜露的含量,如果想用該法定量測定各種不同的糖分,必須使不同的糖分能順利地通過苔黑素檢驗。
用不萊梅苔黑素法檢測棉纖維上的蜜露時,若棉纖維上蜜露值超過或等于色標上的5時,則有黏性。 不萊梅苔黑素測定法屬于全糖測定法。由于糖在分解成糠醛衍生物時,要求的條件比較苛刻,因而該方法的普及性不好。
(二)國內(nèi)測定法
國內(nèi)稱不萊梅苔黑素測定法為定量法,是參照德國不萊梅的苔黑素試驗法進行測定的方法。根據(jù)GB/T16258—1996標準,此法是用3,5-二羥基甲苯—硫酸溶液作顯色劑,使用分完完度計定量測定棉花含糖量的試驗方法。
1.測定原理
在非離子表面活性劑的作用下,使棉纖維上的糖溶于水中,糖在強酸性介質(zhì)中轉(zhuǎn)化為醛類,和3,5-二羥基甲苯發(fā)生顯色反應,生成橙黃色化合物,用分完完度計在425nm處和標準工作曲線比較定量。
2.試劑和材料
(1)蒸餾水(下面全部水指蒸餾水)。
(2)硫酸(濃度1.84g/mL)。
(3)3,5-二羥基甲苯。
3,5-二羥基甲苯—硫酸溶液:稱取3,5-二羥基甲苯0.2g,置于100mL燒杯中,加入100g(約54mL)硫酸,攪拌使之全部溶化。現(xiàn)用現(xiàn)配。
(4)脂肪酸烷醇酰胺(尼納爾,工業(yè)級)。
①測定用脂肪酸烷醇酰胺(0.04%)溶液:稱取0.4g脂肪酸烷醇酰胺溶于1000mL水中,攪拌均勻。
②提取用脂肪酸烷醇酰胺(0.005%)溶液:量取測定用脂肪酸烷醇酰胺溶液100mL,溶于700mL水中,攪拌均勻。
(5)D-果糖。
①糖標準儲備溶液:稱取D-果糖0.200g,用水溶化后轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中,用水稀釋至刻度。濃度為2.0mg/mL。
②糖標準工作溶液:用移液管吸取0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL糖標準儲備溶液,分別注入50mL容量瓶中,用水稀釋至刻度,該糖標準系列濃度分別為0１020mg/mL、0.040mg/mL、0.060mg/mL、0.080mg/mL、0.10mg/mL、0.12mg/mL、0.16mg/mL、0１20mg/mL。
3.主要儀器及器具
(1)分完完度計:波長200～800nm。
(2)天平:分度值0.01g、0.001g。
(3)振蕩器:>200次/min。
(4)恒溫水浴鍋。
(5)250mL磨
4.試驗樣液打算
(1)試驗室樣品:按GB6097—1985規(guī)定抽取實驗室樣品。
(2)試驗樣品:從實驗室樣品中隨機抽取不少于15g的試驗樣品。
(3)試驗試料:去除試驗樣品中粗大雜質(zhì),充分混合(或用混樣品),從中稱取3份作為試料,每份試料重2.0g±0.1g。余樣備用。
5.測定步驟
(1)試樣溶液的配制:取3份試料,分別置于250mL錐形瓶中。加入0.005%脂肪酸烷醇酰胺溶液200mL,在振蕩器上振蕩10min。用玻璃棒將棉花翻過后繼續(xù)振蕩10min,用定量濾紙過濾,得到3份試料溶液。
(2)空白試驗:吸取0.04%脂肪酸烷醇酰胺溶液1.0mL,注于25mL比色管中。將比色管置于70℃恒溫水浴鍋中,快速加入3,5-二羥基甲苯—硫酸溶液2.0mL,搖勻,繼續(xù)置于水浴鍋中40min,取出,加入0.04%脂肪酸烷醇酰胺溶液20mL,搖勻,冷卻至室溫,用0.04%脂肪酸烷醇酰胺溶液定容至刻度。將儀器調(diào)整好,在425nm波長處測定溶液的吸完值,記錄其讀數(shù),保留兩位小數(shù)。
(3)工作曲線繪制:吸取糖標準工作溶液各1.0mL,注于25mL比色管中。重復步驟(2)。
以吸完值為縱坐標、糖的標準工作溶液濃度(mg/mL)為橫坐標繪制工作曲線。
6.結(jié)果計算
用試料溶液的吸完值減去空白溶液的吸完值,在工作曲線上查出試料溶液的濃度,按下式計算糖的含量。

式中:X———試料含糖率;
c———在標準曲線上查得試料溶液中糖的濃度值,mg/mL;200———預處理試料時所加脂肪酸烷醇酰胺溶液量,mL;2×1000———試料重量,mg。
所得結(jié)果修約至兩位小數(shù)。以三次試驗結(jié)果的算術(shù)平均值作為該試料的平均含糖量。本方法適用于棉纖維所含全糖的定量測定,是測定棉纖維含糖比較精確的一種方法。

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